大鼠血肌酐ELISA试剂盒操作步骤
发布时间:2019/9/17 14:38:43 阅读次数:599
上海仁捷生物科技有限公司给大家讲解大鼠血肌酐ELISA试剂盒操作步骤: 一 所有试剂在使用前都要充分混合,不要使液体产生大量泡沫,以免在加入样品时加入大量气泡,造成样品添加误差. 二 根据待测样品数和标准产品数量来确定所需条带数,对每种标准产品和空白孔建议使用复合孔,每个样品按其自身数量确定,可尽可能利用复合孔制成复合孔,样品在1:1稀释后,再加入50μl. 三 在反应孔中加入稀释标准50μl,在反应孔中加入样品50μl,立即加入生物素50μl标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混合,37℃孵育1h. 四 取出孔内的液体,注满洗涤剂,振荡30秒,倒入洗涤液,用吸水性纸干燥.重复操作三次.用板式洗衣机清洗,洗涤次数增加一次. 五 将80μl的亲和酶-HRP轻轻振荡,在37℃中孵育30 min. 六 取出孔内的液体,注满洗涤剂,振荡30秒,倒入洗涤液,用吸水性纸干燥.重复三次,用板式洗衣机洗,洗涤次数增加一次. 七 将底物A和B加入到每个孔中,将底物A和B轻轻混合,37℃孵育10分钟,避光. 八 取出酶标板,快速加入50μl终止液,加入终止液后立即测定结果. 九 在450 nm波长处测量每个孔的OD值.