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发布时间:2019/9/25 16:20:15 阅读次数:531
进行相关实验就要一步一步来,按照步骤正确执行,不然实验结果就会出现偏差.下面一起来了解一下大鼠elisa试剂盒实验前要注意些什么.
一 式样前半小时左右要把大鼠elisa试剂盒从冰箱中取出来.
二 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25).未用完的放回4°C.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40°C水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50°C,使用时洗涤液应为室温).当日使用.
三 标准品: 于10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解后,用移液器将其轻轻混匀(浓度为1000pg/mL).然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反应孔中进行倍比稀释).建议配制成以下浓度:1000 500 250 125 62.5 31.25 15.625 0pg/mL,标准品&样品稀释液直接作为空白孔0pg/mL.如配制500pg/mL标准品:取0.5mL1000pg/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度依此类推.
四 生物素化抗体工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100霯/孔计),实际配制时应多配制100-200霯.使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度.当日使用.
五 酶结合物工作液:实验前计算当次实验所需用量(以100霯/孔计),实际配制时应多配制100-200霯.
使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度.当日使用.
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