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发布时间：2023/12/15 9:17:20 阅读次数：941
1. 准备工作
- 确认实验目的：是检测抗原还是抗体.
- 确认所需要的材料,如样品 缓冲液 洗涤液 酶标二抗 底物等.
- 准备实验设备,如酶标仪 洗板机 移液器 培养板等.
- 将试剂从4℃冷藏或者-20℃冷冻处取出,退冰至室温.
2. 样本和试剂准备
- 根据需要配置缓冲液和其他试剂.
- 准备样品：可能需要稀释或处理样品以适应实验设计.
- 预处理微孔板：如果使用预包被板,通常不需要额外处理.
3. 样品加入
- 使用移液器准确加入样品到微孔板的孔中.
- 添加对照样品,包括阴性对照和阳性对照.
4. 孵化
- 按照说明书上的时间和温度条件进行孵化.
- 有的步骤可能需要在温育后进行洗板,去除未结合的物质.
5. 检测
- 添加酶联抗体和底物,对于含有酶标记的抗体或者抗原进行检测.
- 再次孵化,允许底物与酶反应,产生颜色变化或发光.
6. 结果读取
- 使用酶标仪读取各孔颜色变化的强度,测定吸光度（OD值）.
- 结果通常与对照曲线相比较,以确定样品中的目标分子浓度.
7. 结果分析
- 将数据记录下来,并使用适当的软件进行分析.
- 根据制造商提供的标准曲线计算样品中的抗原或抗体浓度.
8. 清理和维护
- 遵照生物安全规定处理微孔板和其他试验材料.
- 清洁实验设备和工作区域,为下次实验做好准备.
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注意事项：
- 仔细阅读试剂盒说明,在实验前进行必要的准备.
- 严格按照说明操作,避免交叉污染.
- 注意试剂的有效期和存储条件.
- 使用适当的生物安全操作规程处理样品和废弃物.
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