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人维生素B3(VB3)ELISA试剂盒

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 人维生素B3(VB3)ELISA试剂盒仅供科研使用

 

实验原理:                                     

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包人维生素B3VB3)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人维生素B3VB3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。


试剂盒组成:

 

 

 

 

试剂盒操作步骤:

 

 

 

 

实验所需自备试验器材:

1. 酶标仪(450nm

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

 

实验结果计算:

 

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

 

 

 

试剂盒性能:

1.  检测范围0.125 nmol/L  4 nmol/L

2.  灵敏度:最低检测浓度小于0.1 nmol/L

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内变异系数小于10% 板间变异系数小于15% 

 

技术小提示:

1. 当混合或重溶蛋白溶液时,尽量避免起沫。

2. 为了避免交叉感染,配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。

3. 每次孵育时,请正确使用封板胶可保证结果的准确性。

4. 混合后的显色底物在上板前应为无色,请避光保存;假如微孔板后,将由物色变成不同深度的蓝色。

5. 终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致;加入终止液后,孔内颜色由蓝变黄;若孔内有绿色,则表明孔内液体未混匀;请充分混合。

 

产品有效期:6个月

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